کلون، امتزاج و بیان نوترکیب ناحیه 4 آنتی‌ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با زیرواحد B کلرا توکسین در باکتری اشرشیاکلی
نویسندگان
چکیده مقاله:
زمینه و هدف: ترکیب یا اتصال ژنتیکی آنتی ژن ها با زیر واحد B کلرا توکسین =cholera toxin B) (ctB پاسخ آنتی‌بادی موکوسی قوی ای را ایجاد می‌کند. هدف از این مطالعه اتصال ctB به ژن کد کننده ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده (Protective antigen Domain 4=PaD4) به منظور بیان پروتئین کایمریک به عنوان کاندیدا واکسن علیه بیماری سیاه زخم می باشد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی واکنش PCR با پرایمرهای اختصاصی برای ژن های ctBو PaD4 انجام شد و ژن های تکثیر شده به طور جداگانه در PGEM-T easy vector کلون شدند. سپس ژن PaD4 به انتهای '3 ژن ctB با روش هضم آنزیمی متصل شد و ژن امتزاج شده ctB-PaD4 در PET28a زیر همسانه سازی گردید. سویه BL21 باکتری E.coli توسط وکتور نوترکیب ترانسفورم شد و بیان پروتئین کایمر تحت القای ایزوپروپیل- بتا-D-1-گالاکتوپیرانوزید IPTG)) قرار گرفت و به وسیله تکنیک SDS.PAGE و وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: ژن امتزاج شده ctB-PaD4 ساخته شد و با تکنیکPCR و تعیین توالی مورد تأیید قرار گرفت. این ژن در باکتری E.coli سویه BL21در دمای بهینه 37 درجه سانتیگراد بیان گردید و پروتئین کایمر با موفقیت تولید شد. باند مربوط به این پروتئین با تکنیک SDS.PAGE و وسترن بلات تأیید گردید. نتیجه گیری: این پروتئین نوترکیب بعد از بررسی ایمنی زایی می‌تواند به عنوان واکسن زیر واحدی کایمر جدید و موثر علیه باکتری باسیلوس آنتراسیس به صورت خوراکی یا استنشاقی استفاده شود.
منابع مشابه
کلون، امتزاج و بیان نوترکیب ناحیه ۴ آنتی ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با زیرواحد b کلرا توکسین در باکتری اشرشیاکلی
زمینه و هدف: ترکیب یا اتصال ژنتیکی آنتی ژن ها با زیر واحد b کلرا توکسین =cholera toxin b) (ctb پاسخ آنتی بادی موکوسی قوی ای را ایجاد می کند. هدف از این مطالعه اتصال ctb به ژن کد کننده ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده (protective antigen domain 4=pad4) به منظور بیان پروتئین کایمریک به عنوان کاندیدا واکسن علیه بیماری سیاه زخم می باشد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی واکنش pcr با پرایمرهای اخت...
متن کاملاثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین
Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...
متن کاملاثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین
Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...
متن کاملهمسانهسازی و بیان ژن ناحیه یک فاکتور کشنده‌ی (Lethal Factor) باسیلوس آنتراسیس در باکتری Escherichia coli
زمینه و هدف: سیاه‌زخم (آنتراکس) یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل ایجاد کننده بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس می‌باشد که آنتی‌ژن حفاظت‌کننده (PA) و ناحیه یک فاکتور کشنده (LFD1) ایمونوژن‌های قوی این باکتری بوده و همواره به عنوان کاندیدای واکسن علیه باسیلوس آنتراسیس در نظر گرفته شده‌اند. هدف این مطالعه تولید آنتی‌ژن ناحیه یک فاکتور کشنده(LFD1) در باکتری Escherichia coli می‌باشد. روش بررسی:...
متن کاملتولید آنتی ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با استفاده از تکنیک بیان پروتئین های نوترکیب
سیاه زخم توسط باکتری گرم مثبت و اسپوردار باسیلوس آنتراسیس، ایجاد می شود. سم سیاه زخم از سه پروتئین آنتی ژن حفاظتی(pa)، فاکتور کشنده(lf) و فاکتور ادم(ef)، ساخته می شود. واکسن های کنونی علیه سیاه زخم،از pa بعنوان جزء اصلی خود استفاده می کنند، چونکه pa ایمنی حفاظتی ایجاد می کند. ایمنی زایی با این واکسن ها ممکنست که اثرات جانبی را القا کند و به منظور حفظ ایمنی، نیاز به چندین دوز یادآور می باشد. بنا...
15 صفحه اولکلونینگ و بیان ژن کد کننده آنزیم لاکاز از باکتری باسیلوس آنتراسیس سویه QZA2
لاکازها به دلیل توانایی اکسیداسیون طیف گسترده‌ای از ترکیبات فنولی کاربردهای بیوتکنولوژیکی گوناگونی دارند. در این مطالعه سویه بومی QZA2 که از خاک‌های ایران جدا شده است مورد استفاده قرار گرفت. این سویه بر اساس توالی SrRNA 16دارای بیش‌ترین شباهت به باکتری باسیلوس آنتراسیس سویه ATCC 14578 بود. ژن کد کننده آنزیم لاکاز از سویه QZA2 به وسیله پرایمرهای کلونینگ تکثیر شد و سپس محصول PCR در ناقل بیانی (pE...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 15 شماره 2
صفحات 61- 69
تاریخ انتشار 2013-05
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023